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饥饿期粪肠球菌生物膜的形成及次氯酸钠溶液对其作用研究

作者:[db:作者] 点击: 发布时间:2021-09-14 00:00:00
         饥饿期粪肠球菌生物膜形成及次氯酸钠溶液对其感化 研讨 ,目标 :体外树立 对数期、稳固 期、饥饿期的粪肠球菌生物膜模子 ,研讨 分歧 浓度的次氯酸钠溶液对其感化 后果 。
办法 :试验 一:粪肠球菌保种株活化制备成菌悬液,将菌悬液滴加到新颖 配制的TSB造就 液中,分离 在造就 0h、2h、4h、6h、8h、10h、24h、48h、、72h、96h后,取100μl菌液于96孔无菌平底组织造就 板中,用MTT剖析 法检测分歧温度对次氯酸钠溶液有什么影响 时光 点粪肠球菌的细菌活性,绘制粪肠球菌发展 曲线。试验 二:在玻片上树立 的对数期、稳固 期、饥饿期的粪肠球菌生物膜模子 。PBS缓冲液轻柔冲刷 两次,暗室下荧光染色15min后,潮湿 状况 置于激光共聚焦显微镜下,不雅 察对数期、稳固 期、饥饿期粪肠球菌生物膜的形态特色 。试验 三:在24孔无菌平底组织造就 板内,树立 对数期、稳固 期、饥饿期粪肠球菌生物膜模子 ,分离 以1%、2.5%、5.25%次氯酸钠溶液感化 于各时代 粪肠球菌生物膜外面 ,30s、5min、10min后终止药物感化 ,以10倍持续 稀释法,对用药前、后生物膜进行活菌计数,检测其用药后活菌下降 量,并进行统计学剖析 。同时以共聚焦显微镜不雅 察各时代 生物膜在药物感化 后,粪肠球菌生物膜样本的外面 变更 。成果 :试验 一:0-8h,粪肠球菌在充分 的养分 情况 中细菌年夜 量滋生 ,具有高度的活性,呈对数期;8-24h,跟着 造就 时光 的延伸 ,细菌活性到达 高程度 并保持 在相对恒定的状况 ,为稳固 期;48h后,跟着 造就 液中养分 物资 的消费 ,细菌开端 年夜 量逝世 亡,但仍有细菌存活并坚持 必定 活性,为饥饿期。试验 二:共聚焦显微镜不雅 察显示,粪肠球菌生物膜具有立体的空间构造 、形态多样,由逝世 细菌和活细菌构成 。饥饿期生物膜较其它两时代 生物膜细菌密度低。试验 三:次氯酸钠溶液用药后,各时代 粪肠球菌生物膜中的活菌下降 量,饥饿期低于稳固 期,也低于对数期,成果 具有统计学意义(p0.05)。
结论:1.粪肠球菌可以忍耐 饥饿前提 ,在低养分 情况 中坚持 活性,历久 存活。2.饥饿期粪肠球菌具有形成生物膜的才能 ,生物膜形态不规矩 ,外面 活细菌较少,具有典范 的三维立体构造 。3.饥饿期粪肠球菌生物膜与对数期、稳固 期比拟 ,在雷同 药物浓度、雷同 感化 时光 内对次氯酸钠更具有耐药性。雷同 感化 时光 内,5.25%次氯酸钠溶液对饥饿期粪肠球菌生物膜的杀菌后果 最佳;雷同 药物浓度感化 时,10min对饥饿期粪肠球菌生物膜的杀菌后果 最佳。


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